梯度液相色譜儀是目前應用較多的色譜分析方法，液相色譜系統由流動(dòng)相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類(lèi)似于氣相色譜，針對其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調整。
梯度洗脫帶來(lái)的“鬼峰”來(lái)源很多，其中主要來(lái)源于流動(dòng)相和管路，幾乎都有一個(gè)共同的機制：
當流動(dòng)相具有較高的洗脫強度時(shí)，流動(dòng)相中有紫外吸收的有機雜質(zhì)在柱上聚焦成組分帶，并隨后在梯度中洗脫。這些流動(dòng)相雜質(zhì)的潛在“來(lái)源”是廣泛的(如有機相中污染物，水相中污染物，緩沖鹽類(lèi)，流動(dòng)相瓶和混合過(guò)程產(chǎn)生等)。其他原因包括流動(dòng)相輸送的物理或機械方面、樣品引入和固定相效應。各種來(lái)源的鬼峰，讓鬼峰處理變得非常困難。
在色譜分離中，縱向擴散會(huì )增加分離組分帶寬。等度液相色譜中，盡量在縱向擴散超出接受范圍之前洗脫。在梯度洗脫色譜，因為流動(dòng)相配比的變化導致動(dòng)態(tài)壓縮組分帶的主動(dòng)聚焦機制(帶/峰壓縮)。梯度色譜運行，是峰寬擴散和聚焦同步過(guò)程的產(chǎn)物。
聚焦機制可想象一個(gè)組分帶廣泛擴散在高效液相色譜柱的頂部。當施加溶劑梯度時(shí)，帶后部的有機溶劑濃度總是高于帶前部。帶前的組分分子比帶后的組分分子更強地被固定相保留，帶后的成分分子更快移動(dòng)，導致落后的組分分子會(huì )被更強的洗脫液聚集，并更快地向前移動(dòng)以趕上其余的。
帶聚焦機制可聚焦流動(dòng)相中存在的有機雜質(zhì)。在低洗脫劑濃度下有一定保留的雜質(zhì)可能會(huì )隨著(zhù)梯度逐漸聚集成峰。在充分聚焦后，流動(dòng)相鬼峰與分析物峰形接近或相同，聚焦不*時(shí)，它們會(huì )變得更寬或變成其他形狀。理想梯度的液相色譜流動(dòng)相到達梯度最大，該處應僅包含預期的溶劑和試劑，不包含其他物質(zhì)。梯度高效液相色譜分析的不只是樣品，也分析流動(dòng)相的雜質(zhì)和儀器路徑的溶劑。為了區分真實(shí)的分析物峰和這些鬼峰，必須進(jìn)行空白進(jìn)樣的檢查（溶劑空白）。
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